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一眼就会的裸鼠成瘤操作

提问网友 发布时间:2025-02-05 05:11
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热心网友 回答时间:2025-02-08 07:34
细胞株移植瘤模型,简称CDX,是一种将体外培养的肿瘤细胞接种到免疫缺陷小鼠体内的技术。具体来说,这是将人源或鼠源细胞注入免疫缺陷的裸鼠皮下,通过一系列条件来观察肿瘤的形成、发展和抗肿瘤药物的效果。

肿瘤细胞分为良性和恶性两种。其中,癌细胞属于恶性细胞,具有扩散的特性。肿瘤细胞包括癌细胞,它们的共同特点是基因水平上的失控,能够无限增殖。癌细胞具有三个显著的基本特征:不死性、迁移性和不会发生接触抑制反应。

一些常规容易成瘤的细胞包括:Hep-G2(肝癌)、NCI-H460(大细胞肺癌)、97H(人肝癌细胞)、4T1(小鼠乳腺癌)、SK-OV-3(卵巢癌)、MCF-7(乳腺癌)、SKBR3、A375/B16-F10(人黑色素素瘤细胞)、H1299(肺癌)、SPC-A-1(肺腺癌)、HT-29/HCT116(结肠癌)、MDA-MB-231乳腺癌、CT26(小鼠结肠癌细胞)、U87(人胶质瘤细胞)和PC-3(人前列腺癌细胞)等。

选择荷瘤裸鼠时,一般选择4-6周龄的BALB/c-nu裸小鼠。

操作步骤如下:

1. 选择处于对数生长期的细胞,细胞密度达到80-90%左右为宜。

2. 使用胰酶消化细胞后,用预冷的PBS清洗1-2次,以去除细胞中残余的血清。

3. 使用PBS或0.85%生理盐水吹打细胞沉淀至合适的浓度,皮下瘤接种的细胞量一般为1-5×10^6个细胞/支,接种体积为0.1-0.2ml,因此细胞悬液的浓度为1-5×10^7个细胞/ml。细胞消化后应尽快接种到裸鼠皮下,一般尽量在半小时内完成(如果接种量较大,可以分批接种)。途中将细胞悬液放在冰上降低细胞的代谢以保持细胞的活性。

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