磁珠是由微小铁氧化物颗粒组成的,拥有超顺磁性,能够在有外部磁场时表现出磁性行为。这些磁珠具有悬浮液中的分离特性,且在磁场外不相互吸引,使用时无需担心结块。它们广泛应用于核酸、蛋白质和其他生物大分子的磁分离,方法简单、高效且可扩展。磁珠有多种类型,表面涂层和化学成分不同,适用于第二代测序(NGS)、聚合酶链反应(PCR)样品制备、蛋白质纯化、分子和免疫诊断等,甚至磁激活细胞分选(MACS)。
磁分离是利用磁场从悬浮液中分离微米大小的顺磁性颗粒。在分子生物学中,磁珠为纯化各种生物大分子提供简单可靠的途径,如基因组DNA、质粒、线粒体DNA、RNA和蛋白质。磁珠结合DNA后,通过外部磁场吸引到管外缘,固定下来。在洗涤步骤中保留结合的DNA,加入洗脱缓冲液,去除磁场后释放纯化的DNA,准备定量和分析。磁珠提取方法无需真空或离心,减少了对目标分子的压力,比其他DNA提取方案更简便、自动化。
磁珠提取DNA方法从20世纪90年代的专利开始,依赖带有涂层的磁珠,通过调整缓冲液条件可逆地结合核酸。结合DNA后,通过磁场固定磁珠,洗涤步骤保留结合的DNA。加入洗脱缓冲液,释放磁场,将DNA释放出来作为纯化样品。磁珠提取方法不需要真空或离心,减少了对目标分子的压力,比其他DNA提取方案更简便、自动化,并适合在24、96和384孔板中实现自动化。磁珠提取DNA过程简单、高效,适用于多种类型样品,受到广泛欢迎。现今,许多生产厂家已开发出基于磁珠的商业核酸分离试剂盒,适用于不同应用,包括无差别结合、序列或标签特定结合的磁珠类型。
表1总结了最新磁珠类型及其特性和应用。磁珠在核酸纯化方面具有潜力,适用于多种生物大分子分离,包括基因组DNA、质粒、线粒体DNA、RNA和蛋白质。它们在分子生物学应用中展现出高效、简单和可扩展的特性,使得磁珠在现代科研和生物医学领域得到广泛应用。更多资讯,请关注公众号“诊断科学”(DiagnosticsScience)。
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