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高通量测序参数—测序深度

提问网友 发布时间:2025-01-27 09:58
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1个回答
热心网友 回答时间:2025-01-27 10:06
在高通量测序领域,测序深度是衡量测序质量的关键参数,它代表了目标区域被测序的次数。以10次测序为例,测序深度为10X。然而,选择合适的测序深度并非易事,它受到多种因素的影响。
不同类型的样本和检测目标对测序深度的需求各不相同。组织样本通常选用1000X至2000X的深度,而游离DNA样本则需要更高的深度,4000X至10000X不等。如中国2022版ctDNA高通量测序临床实践专家共识中所推荐,血浆cfDNA的有效深度应超过1000X;NCCN则建议基于signatera扩增子的分析,平均深度至少达到10万以上。
理论上,测序深度越高,检测结果的准确性也越高。但实践中,并不会选择无限深度的测序,这是因为成本和时间限制。以目标区域大小为1M为例,测序深度2000X产生的原始数据量约为2G,分析1G数据大约需要4小时,因此2G数据的分析时间约为8小时。若测序深度提升至10万X,则原始数据量激增至100G,相应的分析时间则延长至400小时,即约16天。考虑到靶向捕获测序区域一般在几个M范围内,全外显子组约为30M,全基因组则达到3000M,因此在考虑时间和费用的情况下,靶向捕获测序的深度可以适当提高,而对于全外显子或全基因组测序,通常不会选择过深的测序深度。
综上所述,测序深度的选择需综合考虑样本类型、检测目标、时间和费用等因素,以达到最优的检测结果。若有描述不准确之处,欢迎指正。

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