米氏方程v=Vmax×[S]/（Km+[S])描述了酶促反应的动力学特性，其中Vmax表示酶被底物饱和时的最大反应速度，Km是酶促反应速度达到最大值一半时的底物浓度。Km的单位通常是mol/L，仅由酶的性质决定，不受酶浓度的影响。通过Km值可以鉴别不同的酶，因为不同酶具有不同的Km值。
当底物浓度非常大时，反应速度接近恒定值，此时酶几乎被底物饱和，反应相对于底物S呈现零级反应，即增加底物对反应速度影响不大。最大反应速度Vmax可以定义为处于饱和底物浓度下的起始反应速度n。反应速度方程还可以表示为n（饱和时）=Vmax=k[E][S]0=k[E]total=kcat[ES]，其中kcat是ES转化为游离E和产物的速度常数，表明饱和时所有E都以ES形式存在。
米氏常数Km的物理意义在于，当酶促反应速度为最大速度的一半时，对应的底物浓度即为Km值。Km还可以用来反映酶与底物的亲和力，Km越小，表明酶与底物的亲和力越大。
Km可用于判断反应级数：当底物浓度远小于Km时，反应为一级反应；当底物浓度远大于Km时，反应为零级反应；当底物浓度介于二者之间时，反应为混合级反应。Km是酶的特征性常数，在一定条件下，某种酶的Km值是恒定的，可用于判断是否为不同的酶。Km还用于判断酶的最适底物，Km值最小的底物为最适底物。
确定酶活性测定时所需的底物浓度时，通常选择[S]=10Km，此时ν约为91%Vmax，是最合适的测定酶活性所需的底物浓度。Vmax可用于计算酶的转换数，即单位时间内每个酶分子催化底物转变为产物的分子数。
测定Km和Vmax的主要方法是Lineweaver-Burk双倒数作图法和Hanes作图法。固定酶浓度，分析不同底物浓度下的起始速度，可以获得Km和Vmax值。双倒数作图直观易懂，便于识别不同类型的抑制作用。竞争性抑制使Km值增大，Vmax值不变；非竞争性抑制使Km值不变，Vmax值变小；反竞争性抑制使Km值变小，Vmax值变小，但Vmax/Km值不变。
本文如未解决您的问题请添加抖音号：51dongshi（抖音搜索懂视），直接咨询即可。
热心网友
回答时间：2025-01-15 12:47
