细胞增殖能力检测是生物学研究中的重要指标，广泛应用于多种领域。检测方法主要包括直接计数分裂细胞和通过活性细胞数目间接反映增殖能力。BrdU标记法是直接测定细胞DNA复制和增殖能力的一种准确方法。BrdU可替代胸腺嘧啶核苷插入DNA双链，稳定存在于子代细胞中。通过免疫学方法检测DNA中的BrdU含量，判断细胞增殖。
实验步骤涉及细胞培养、BrdU标记、细胞固定和BrdU检测。首先，将细胞接种于孔板中，培养至60%密度。接着，加入BrdU溶液，40分钟后取出，进行细胞固定和变性，之后用鼠抗BrdU单克隆抗体特异性识别BrdU，并通过辣根过氧化酶标记的抗体进行检测。最后，使用显色底物进行显色反应，通过显微镜计数细胞总数和BrdU阳性细胞数。
实验操作时需注意BrdU的光敏性和不稳定性，应避光操作和使用，避免光分解，且确保溶液现配现用。此外，BrdU对机体有不可逆损伤，使用时务必注意安全。
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回答时间：2025-03-22 11:42
