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【五分钟讲实验】血管生成实验技巧及研究思路

提问网友 发布时间:2025-01-09 16:34
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热心网友 回答时间:2025-01-10 23:48
血管生成(Angiogenesis)是从已有的毛细血管或毛细血管后静脉发展而形成新的血管,对于器官生长、胚胎发育和伤口愈合在内的多种过程至关重要。血管生成的基本过程包括血管萌发、血管延伸、血管融合和血管变化。研究人员可使用多种方法研究血管生成过程,如杂交瘤模型、血管形成实验、鸡胚膜血管生成实验、管腔形成实验、小鼠Matrigel注射和兔角膜血管生成实验等。

血管生成实验方法对比和应用及机制通路探讨,血管生成在疾病研究中具有广泛的应用。例如,在癌症研究中,恶性肿瘤通过高表达血管生成因子和细胞因子,下调内源性血管生成抑制因子来触发血管生成,以逃避免疫系统和治疗措施的攻击。临床上治疗肿瘤的抗血管生成药物主要通过靶向VEGF-VEGFR-2信号通路研发。然而,治疗肿瘤的抗血管生成药物仍面临对大多数类型癌症生存获益有限、单药治疗无效、原发性与继发性耐药、缺乏有效区分获益人群的标志物、最佳治疗时间不确定及与其他抗肿瘤药物联合应用合理性等问题。

在眼部疾病研究中,视网膜中过多的新生血管生成与局部低氧环境诱导的血管生成因子过度产生有关,VEGF是关键的乏氧诱导血管生成因子。临床应用的抗血管生成药物如雷珠单抗和阿柏西普,通过降低VEGF诱导的血管通透性,有效改善AMD患者的视力。心血管疾病中,心肌缺血时通过分泌VEGF刺激血管新生以提供更多的氧气和营养物质。帕金森病患者大脑中新生神经元数量减少可能导致失调,增加血管因子浓度可促进神经元增殖并对协调运动有益。代谢性疾病如肥胖和2型糖尿病也依赖于血管生成,抑制血管生成可能有助于预防肥胖。

血管形成实验的基本原理涉及内皮细胞保留分裂和快速迁移能力,响应血管生成信号。实验操作包括准备基质胶、细胞消化、计数和稀释、加入细胞悬液和常规培养。在实验过程中应注意垂直悬空滴入基质胶、垂直加入细胞悬液、使用预冷的枪头、EP管和96孔板等。

血管生成实验结果分析和注意事项对实验成功至关重要。正确执行实验步骤和注意事项可确保实验结果的准确性和可重复性。

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